溶酶體熒光探針（Probes for Lysosomes）專題
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溶酶體（Lysosome）；Acidic Organelle 酸性細(xì)胞器；MitoTracker；MitoSOX；LysoTracker；LysoSensor；溶酶體貯積癥（Lysosome Storage Diseases，LSDs）
基本介紹：
溶酶體（Lysosome）又稱為溶質(zhì)體，是由單層膜圍成的球狀體，主要化學(xué)成分為脂類和蛋白質(zhì)。溶酶體內(nèi)富含幾十種酸性水解酶，包括蛋白酶、核酸酶、磷酸酶、糖苷酶、脂肪酶、磷酸酯酶及硫酸酯酶等，能夠控制多種內(nèi)源性和外源性大分子物質(zhì)的消化。因此，溶酶體具有溶解或消化功能，是物質(zhì)代謝的場所。
溶酶體結(jié)構(gòu)和功能異常引起的疾病稱為溶酶體病。常見的有溶酶體相關(guān)的遺傳性疾病，致病機(jī)理在于酸性水解酶合成基因突變引起酶合成障礙，造成溶酶體酶缺乏，從而致使相應(yīng)酶代謝底物不能降解而積蓄在溶酶體中，造成細(xì)胞代謝障礙，形成溶酶體貯積癥。溶酶體異常還與休克、類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎、腫瘤等疾病發(fā)生有關(guān)聯(lián)。
溶酶體系列探針：
一、LysoTracker Probes（酸性細(xì)胞器選擇性的細(xì)胞膜滲透性探針）
1、傳統(tǒng)溶酶體探針的缺點(diǎn)：
弱堿性胺類選擇性聚積在低pH的細(xì)胞區(qū)室（cellular compartments），可用來研究溶酶體的生物合成和發(fā)病機(jī)制。zui常用的一種酸性細(xì)胞器探針為DAMP，本身無熒光，需要與抗DNP抗體聯(lián)合使用，并直接或間接偶聯(lián)到熒光素或酶上，從而可視化觀察染色特征。熒光探針中性紅和吖啶橙也常用來染酸性細(xì)胞器，即使無染色特異性。
2、LysoTracker溶酶體探針的優(yōu)點(diǎn)
正是以上缺點(diǎn)促使我們開發(fā)替代性的酸性細(xì)胞器選擇性探針，用于短期和長期示蹤研究。
Lysotracker探針是向酸性熒光探針，用于活細(xì)胞內(nèi)酸性細(xì)胞器的標(biāo)記和示蹤。這些探針具有幾個(gè)重要特征，包括高度選擇靶向酸性細(xì)胞器和納摩爾濃度有效標(biāo)記活細(xì)胞。另外，LysoTracker系列有幾種熒光顏色，特別適合用于多色標(biāo)記實(shí)驗(yàn)。
Lysotracker探針，含一連接到弱堿基上的熒光素，中性pH下呈部分質(zhì)子化，能夠自由穿透細(xì)胞膜且典型聚集在球形細(xì)胞器上。研究發(fā)現(xiàn)，Lysotracker探針必須在極低濃度（通常約50nM）下才能獲得優(yōu)異的選擇性。這些探針的滯留（retention）機(jī)制雖然沒有被*研究透，但很可能與酸性細(xì)胞器的質(zhì)子化和滯留性有關(guān)，即使后續(xù)的弱堿性細(xì)胞滲透化合物處理細(xì)胞通常不會(huì)可逆化染色結(jié)果。Lysotracker探針的內(nèi)吞化動(dòng)力學(xué)研究顯示染料進(jìn)入活細(xì)胞的攝入速率僅幾秒即可。然而，這些溶酶體探針會(huì)導(dǎo)致溶酶體被堿化，比如長期孵育會(huì)誘使溶酶體pH的增加。因此，建議成像前用探針孵育細(xì)胞的時(shí)間僅1-5min就好。
3、LysoTracker溶酶體探針產(chǎn)品
我們提供5種Lysotracker探針，它們在光譜特性和使用特點(diǎn)上有所差異，具體見下表。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | Ex/Em(nm) | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
L7525 | LysoTracker Blue DND-22 藍(lán)色 | 373/422 | 20 x 50 µL | 4,298.00 |
L7526 | LysoTracker Green DND-26 綠色 | 504/511 | 20 x 50 µL | 4,319.00 |
L12491 | LysoTracker® Yellow-HCK-123 黃色 | 465/535 | 20 x 50 µL | 4,267.00 |
L7528 | LysoTracker® Red DND-99 紅色 | 577/590 | 20 x 50 µL | 4,268.00 |
L12492 | LysoTracker® Deep Red 遠(yuǎn)紅 | 647/668 | 5 x 50 µL | 3,215.00 |
以上所有產(chǎn)品均為Life（Invitrogen）原裝，原始包裝為20x50 µl（20支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成）或5x50 µl（5支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成）。我司對(duì)L7526，L7528進(jìn)行拆開銷售，特惠價(jià)為380元/支，單支50µl，現(xiàn)貨銷售，歡迎訂購。
二、LysoSensor Probes（酸性細(xì)胞器選擇性的pH指示劑）
1、產(chǎn)品描述
為滿足研究者研究活細(xì)胞內(nèi)溶酶體生成和功能的動(dòng)力學(xué)特征，特此開發(fā)Lysosensor系列探針。
LysoSensor探針是一種區(qū)分酸性細(xì)胞器的熒光pH指示劑。該系列染料屬于向酸性探針，能夠聚集在呈質(zhì)子化的酸性細(xì)胞器上。這一質(zhì)子化過程使得因弱堿性側(cè)鏈而封閉熒光的探針得以熒光釋放，促使熒光信號(hào)增強(qiáng)。因此，LysoSensor探針遇酸后熒光信號(hào)呈現(xiàn)pH依賴性的增強(qiáng)。
2、 LysoSensor溶酶體探針產(chǎn)品
我們提供3種Lysosensor探針，它們在光譜特性和使用特點(diǎn)上有所差異，具體見下表。
貨號(hào) | 產(chǎn)品名稱 | Ex/Em(nm) | pKa | 規(guī)格 | 價(jià)格（元） |
L7533 | LysoSensor Blue DND-167 藍(lán)色 | 373/425 | 5.1 | 20 x 50 µL | 4,174.00 |
L7535 | LysoSensor Green DND-189 綠色 | 443/505 | 5.2 | 20 x 50 µL | 4,225.00 |
L7545 | LysoSensor Yellow/Blue DND-160 藍(lán)/黃色 | 384/540, 329/440 | 4.2 | 20 x 50 µL | 4,211.00 |
以上所有產(chǎn)品均為Life（Invitrogen）原裝，原始包裝為20x50 µl（20支50µl單個(gè)包裝構(gòu)成）。我司對(duì)L7545進(jìn)行拆開銷售，特惠價(jià)為550元/支，單支50µl，現(xiàn)貨銷售，歡迎訂購。
— —Written/Edited by V. Shallan【版權(quán)歸MKBio懋康所有】
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